pNLF1-secN [CMV/Hygro] Vector sequence reference points:

Base pairs                                                   6005
CMV immediate early enhancer/promoter                        1–742
Chimeric intron                                              857–989
T7 RNA polymerase promoter                                   1033–1052
secNanoLuc® protein coding region                            1067–1663
Linker                                                       1664–1675
Multiple cloning region                                      1676–1751
SV40 late poly(A) region                                     1814–2035
SV40 early enhancer/promoter                                 2134–2546
Synthetic hygromycin (Hygr) coding region                    2577–3614
Synthetic poly(A) signal                                     3638–3686
β-lactamase (Ampr) coding region                             3947–4807
ColE1-derived plasmid replication origin                     4962–4998 

NanoLuc螢光素酶融合表達載體pNLF1-secN

更小（19.1kDa）、更亮（比螢火蟲和海腎螢光素酶亮度高 100 倍）的 NanoLuc螢光素酶（Nluc）非常適用于蛋白融合應用。NanoLuc 融合蛋白應用廣泛：作為蛋白穩定性報告基因、生物發光法細胞成像（BLI）探針或作為供體信號用于生物發光共振能量轉移（BRET）研究蛋白: 蛋白或蛋白: 小分子相互作用研究。
NanoLuc 蛋白融合載體可方便的 N- 或 C-端融合 Nluc 和您感興趣蛋白的融合蛋白；有兩類形式載體可供選擇：
pNLF 載體系列：產生 N- 或 C- 端融合全長 Nluc 的融合蛋白或應用傳統的克隆方法（多克隆位點）將分泌型 Nluc 克隆到感興趣的蛋白 N 端。 
pF 載體系列：使用 Flexi Vector Cloning System 產生 N- 端或 C- 端融合蛋白；Flexi Vector Cloning System 是一種直接克隆方法，基于兩種稀有酶切位點 SgfI 和 PmeI，可以在 Flexi 載體之間轉換蛋白編碼序列，快速、高效和高保真。

特點 - 優點
 輕松定量蛋白豐度變化：使用 Nano-Glo Luciferase Assay System 進行單一試劑加樣，來定量 NanoLuc 融合蛋白的信號，進而檢測細胞內蛋白水平。
 生物相關性更高：NanoLuc 報告基因光信號更強，內源性表達水平的 NanoLuc 融合蛋白即可被檢測到，可避免過度表達造成的假象。
 使蛋白的細胞內動態變化可視化：NanoLuc 報告基因光信號更強，縮短了成像曝光時間，無需反復激發樣本，從而降低了激發造成的細胞毒性反應。
 改進 BRET 研究技術：NanoLuc 擁有更強的光信號，藍移的發射光譜，因而與熒光受體的光譜交叉更少，信噪比更佳，動態范圍更寬。
 靈活的克隆選擇：可使用傳統克隆方法或 Flexi 克隆系統輕松將 NanoLuc 與目標蛋白的 C 端或 N 端融合。
 可實現從瞬時轉染到穩定轉染的輕松過渡：所有載體都含有用于建立穩定細胞系的哺乳動物篩選標志物。

應用
 化合物篩選
 蛋白: 蛋白相互作用
 蛋白: 小分子相互作用
 生物發光成像
 蛋白穩定性研究