一個高效的大腸桿菌蛋白表達載體首先要有強的啟動子，即RNA聚合酶的結合部位，而且這個啟動子*好是可以調控的；此外，還需要SD序列，即核糖體結合位點。SD序列的組成及其與起始密碼子AUG間的距離，都會顯著地影響翻譯水平。轉錄終止序列對穩定宿主載體系統非常重要，因為即使插入片段不含轉錄終止信號，由此亦可避免發生通讀所造成的質粒不穩定。大腸桿菌的轉錄終止有依賴和不依賴rho蛋白兩種形式，表達載體*好是后者，高效表達質粒pBV221具有以上特點，經常被用于多種蛋白表達。