95D【人肺巨細(xì)胞癌細(xì)胞(高轉(zhuǎn)移)】代數(shù)低，狀態(tài)好，發(fā)貨快，細(xì)胞庫管理規(guī)范，種類齊全，價格優(yōu)惠，在做傳代細(xì)胞培養(yǎng)之前，首先將培養(yǎng)瓶置于顯微鏡下，觀察培養(yǎng)瓶中細(xì)胞是否已長成致密單層，如已長成單層，即可進行細(xì)胞的傳代培養(yǎng)。
95D【人肺巨細(xì)胞癌細(xì)胞(高轉(zhuǎn)移)】描述
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞數(shù)量：1×106個
細(xì)胞傳代：1:3傳代,2-3天傳一代
細(xì)胞純度：92.2％
細(xì)胞活力：88.4％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
細(xì)胞檢測：細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、**、酵母和**
細(xì)胞凍存：液氮凍存（完全培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS）
細(xì)胞運輸：干冰運輸（1
Vial）或活細(xì)胞運輸（T-25
flasks）
細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和**
95D【人肺巨細(xì)胞癌細(xì)胞(高轉(zhuǎn)移)】培養(yǎng)條件
1640,90%；上等胎牛血清，10%
氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%
溫度：37攝氏度
95D【人肺巨細(xì)胞癌細(xì)胞(高轉(zhuǎn)移)】傳代方法
顯微鏡下觀察細(xì)胞，當(dāng)覆蓋80%底面積時，進行細(xì)胞傳代。注意不要等到細(xì)胞覆蓋100%的時候才傳代，那樣細(xì)胞容易老化。在生物**柜或者超凈臺中，將培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基倒到廢液缸中用PBS或者生理鹽水洗一遍加入1.5ml
0.25%含有EDTA的胰酶，在37℃培養(yǎng)箱中消化3-5分鐘后取出細(xì)胞，加入5ml培養(yǎng)基，吹打均勻后，轉(zhuǎn)移到15ml離心管中，1000rpm 離心5分鐘離心后，去掉上清，用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，按照1:3的比例進行細(xì)胞傳代培養(yǎng)。
95D【人肺巨細(xì)胞癌細(xì)胞(高轉(zhuǎn)移)】傳代密度均勻，有以下幾點比較重要：
1.盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對于易于消化的細(xì)胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時間。我見過有些剛進實驗室的師弟師妹，一上來就加1-2ml胰酶，結(jié)果細(xì)胞團大片脫落，雖然有后續(xù)吹打步驟，但我覺得效果不佳。至于難消化的細(xì)胞，怎么掌握分寸，還待自己摸索或其他戰(zhàn)友分享。
2.在以上基礎(chǔ)上，我覺得細(xì)胞吹勻，這步比上述提到的十字移動等更為重要。如傳代1:4 ,可以收集所有細(xì)胞至離心管，加入培養(yǎng)液重懸混勻，吸管緩慢吹打20-30次，可配合水平搖晃離心管。
3.此外我覺得培養(yǎng)液的量可能也會有講究，如6孔板中你*終加入2ml細(xì)胞懸液，尤其像這樣的小面積培養(yǎng)皿，液體表面有張力，細(xì)胞易于聚集在中間，所以我一般6孔板再加1ml以消除影響，吸管緩慢吹打15-20次左右繼續(xù)混勻。
L1210【小鼠白血病細(xì)胞】 D229 L1210 小鼠白血病細(xì)胞 小鼠 1640 懸浮
L6565【小鼠白血病克隆細(xì)胞系】 D230 L6565 小鼠白血病克隆細(xì)胞系 小鼠
RAW 264.7【小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞】 D231 RAW 264.7 小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞 小鼠 DMEM 貼壁
K7M2 wt [K7M2-WT]【小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞】 D232 K7M2 wt [K7M2-WT] 小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞 小鼠
4T1【小鼠乳腺癌細(xì)胞】 D233 4T1 小鼠乳腺癌細(xì)胞 小鼠 1640 貼壁
C127【小鼠乳腺腫瘤細(xì)胞】 D234 C127 小鼠乳腺腫瘤細(xì)胞 小鼠
F9【小鼠畸胎瘤細(xì)胞】 D235 F9 小鼠畸胎瘤細(xì)胞 小鼠
P19【小鼠睪丸畸胎瘤細(xì)胞】 D236 P19 小鼠睪丸畸胎瘤細(xì)胞 小鼠 MEM 貼壁
B16【小鼠黑色素瘤細(xì)胞】 D237 B16 小鼠黑色素瘤細(xì)胞 小鼠 1640 貼壁
B16-F10【小鼠皮膚黑色素瘤細(xì)胞】 D238 B16-F10 小鼠皮膚黑色素瘤細(xì)胞 小鼠
CT26.WT【小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞】 D239 CT26.WT 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞 小鼠 1640 貼壁
RAG【小鼠腎腺癌細(xì)胞】 D240 RAG 小鼠腎腺癌細(xì)胞 小鼠
