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產(chǎn)品資料

單純皰疹病毒II型(HSV-II)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)

如果您對(duì)該產(chǎn)品感興趣的話,可以
產(chǎn)品名稱: 單純皰疹病毒II型(HSV-II)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)
產(chǎn)品型號(hào): HSV-II
產(chǎn)品展商: HZbscience
產(chǎn)品文檔: 無相關(guān)文檔

簡(jiǎn)單介紹

單純皰疹病毒II型(HSV-II)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)用特異性引物,結(jié)合一條特異性熒光探針,用一步法熒光 RT-PCR 技術(shù)對(duì)單純皰疹病毒II型(HSV-II)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)RNA 進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測(cè),不同批號(hào)的試劑盒組分不可交互使用,此試劑盒僅供科研使用。


單純皰疹病毒II型(HSV-II)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)  的詳細(xì)介紹

單純皰疹病毒II型(HSV-II)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)

【包裝規(guī)格】48 份/盒

【檢測(cè)方法】RT-PCR 熒光探針法

【檢驗(yàn)原理】

本試劑盒用特異性引物,結(jié)合一條特異性熒光探針,用一步法熒光 RT-PCR 技術(shù)對(duì)單純皰疹病毒II型(HSV-II)RNA 進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測(cè),僅用于科研使用。

【試劑組成】

名 稱

規(guī) 格

酶液

50μl×1 管

反應(yīng)液

1.0ml×1 管

陽(yáng)性質(zhì)控品

50μl ×1 管

陰性質(zhì)控品

250μl ×1 管

單純皰疹病毒II型(HSV-II)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)說明:不同批號(hào)的試劑盒組分不可交互使用。

【儲(chǔ)存條件及有效期】

-20℃±5℃,避光保存、運(yùn)輸、反復(fù)凍融少于 5 次,有效期 12 個(gè)月。

【適用儀器】

ABI 7300、7500、ABI stepone / stepone plus 、安捷倫 MX3000P/3005P、MJOpticon2 等其他熒光定量 PCR 檢測(cè)儀。

【標(biāo)本采集】

剖檢豬取腸內(nèi)容物和腸系膜**結(jié);待檢活豬,取排泄物,于離心管中。

【保存和運(yùn)輸】

上述標(biāo)本短期內(nèi)可保存于-20℃,長(zhǎng)期保存可置-70℃,但不能超過 6 個(gè)月,標(biāo)本運(yùn)送應(yīng)采用 2~8℃冰袋運(yùn)輸,嚴(yán)禁反復(fù)凍融。

【使用方法】

1. 樣品處理(樣本處理區(qū))

1.1樣本前處理

組織:分別從腸系膜**結(jié)的 3 個(gè)不同位置取樣,稱取樣品約 1g,用手術(shù)剪剪碎混勻,再稱取 0.05g 于研磨器中研磨,加入 1.5mL 生理鹽水繼續(xù)研磨,待勻漿后轉(zhuǎn)至 1.5mL **離心管中,8000rpm 離心 2min,取上清液 100uL 于 1.5mL **離心管中;排泄物:取 0.05g 于 1.5mL **離心管中,加入 1mL生理鹽水渦旋振蕩,8000rpm 離心 2min,取上清液 100uL 于 1.5mL **離心管中。

1.2RNA 提取

RNA 提取試劑盒(離心柱提取法),請(qǐng)按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。

2. 試劑配制(試劑準(zhǔn)備區(qū))

單純皰疹病毒II型(HSV-II)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)根據(jù)待檢測(cè)樣本總數(shù),設(shè)所需要的 PCR 反應(yīng)管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對(duì)照+1 管陽(yáng)性對(duì)照;樣品每滿 7 份,多配制 1 份),每測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:

試劑

反應(yīng)液

酶液

用量

20μl

1μl

3. 加樣(樣本處理區(qū))

將步驟 1 提取的 RNA、陽(yáng)性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取 4μl,分別加入相應(yīng)的反應(yīng)管中,蓋好管蓋,混勻,短暫離心。

4. PCR 擴(kuò)增(核酸擴(kuò)增區(qū))

4.1將待檢測(cè)反應(yīng)管置于熒光定量 PCR 儀反應(yīng)槽內(nèi);

4.2設(shè)置好通道、樣品信息,反應(yīng)體系設(shè)置為 25ul;熒光通道選擇:

檢測(cè)通道(Reporter Dye)FAM, 淬滅通道(Quencher Dye)NONE,請(qǐng)勿選擇 ROX 參比熒光。

4.3推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置:

步驟

循環(huán)數(shù)

溫度

時(shí)間

收集熒光信號(hào)

1

1cycle

42℃

20min

2

1 cycle

95℃

10min

3

40 cycle

94℃

15sec

55℃

30sec

5. 單純皰疹病毒II型(HSV-II)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)結(jié)果分析判定

5.1結(jié)果分析條件設(shè)定

設(shè)置 Baseline 和 Threshold:一般直接按機(jī)器自動(dòng)分析的結(jié)果分析,當(dāng)曲線出現(xiàn)整體傾斜時(shí),根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline 的 start 值(一般可在 3~15范圍內(nèi)調(diào)節(jié))、stop 值(一般可在 5~20 范圍內(nèi)調(diào)節(jié)),以及 Threshold 的 Value值(上下拖動(dòng)閾值線至高于陰性對(duì)照),重新分析結(jié)果。

5.2結(jié)果判斷

陽(yáng)性:檢測(cè)通道 Ct 值≤35.0,且曲線有明顯的指數(shù)增長(zhǎng)曲線;

可疑:檢測(cè)通道 35.0<Ct 值≤37,建議重復(fù)檢測(cè),如果檢測(cè)通道仍為 35.0<Ct值≤37,且曲線有明顯的增長(zhǎng)曲線,判定為陽(yáng)性,否則為陰性;

陰性:樣本檢測(cè)結(jié)果 Ct 值>37 或無 Ct 值。

6. 檢測(cè)方法的局限性

? 樣本檢測(cè)結(jié)果與樣本收集、處理、運(yùn)送以及保存質(zhì)量有關(guān);

? 樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果;

? 陽(yáng)性對(duì)照、擴(kuò)增產(chǎn)物泄漏,會(huì)導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果;

? 病原體在流行過程中基因突變、重組,會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果;

? 不同的提取方法存在提取效率差異,會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果;

? 試劑運(yùn)輸,保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測(cè)效能下降,出現(xiàn)假陰性或定量檢測(cè)不準(zhǔn)確的結(jié)果;

? 本檢測(cè)結(jié)果僅供參考,如須確診請(qǐng)結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測(cè)手段。

7. 質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)

陰性質(zhì)控品:無明顯擴(kuò)增曲線或無 Ct 值顯示;

陽(yáng)性質(zhì)控品:擴(kuò)增曲線有明顯指數(shù)生長(zhǎng)期,且 Ct 值≤32;

以上條件應(yīng)同時(shí)滿足,否則實(shí)驗(yàn)視為無效。

8. 產(chǎn)品性能指標(biāo)

陰陽(yáng)性參考品符合率:5 份陽(yáng)性參考品符合率為 100%;10 份陰性參考品符合率為 100%。

*低檢測(cè)限:5.0×102copies/ml。

精密度:批內(nèi)、批間精密度檢測(cè) Ct 值的變異系數(shù)(CV)均小于等于 3%。

單純皰疹病毒II型(HSV-II)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)【注意事項(xiàng)】

? 所有操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行;

? 試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化,完全混勻并短暫離心;

? 反應(yīng)液應(yīng)避光保存;

? 反應(yīng)中盡量避免氣泡存在,管蓋需蓋緊;

? 使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服;

? 樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進(jìn)行,以免交叉污染;

? 實(shí)驗(yàn)完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺(tái)和移液器;

? 試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對(duì)待,并按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物**通則》進(jìn)行處理。

人星狀病毒(HastV)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格:48人份/盒 精密度:批內(nèi)、批間精密度檢測(cè) Ct 值的變異系數(shù)(CV)均小于等于 3%。
札如病毒(SV)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格:48人份/盒 精密度:批內(nèi)、批間精密度檢測(cè) Ct 值的變異系數(shù)(CV)均小于等于 3%。
創(chuàng)傷弧菌(VV)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格:48人份/盒 精密度:批內(nèi)、批間精密度檢測(cè) Ct 值的變異系數(shù)(CV)均小于等于 3%。
溶藻弧菌(VA)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格:48人份/盒 精密度:批內(nèi)、批間精密度檢測(cè) Ct 值的變異系數(shù)(CV)均小于等于 3%。
腸道腺病毒(EADV)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格:48人份/盒 精密度:批內(nèi)、批間精密度檢測(cè) Ct 值的變異系數(shù)(CV)均小于等于 3%。
雙歧桿菌(BD)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格:48人份/盒 精密度:批內(nèi)、批間精密度檢測(cè) Ct 值的變異系數(shù)(CV)均小于等于 3%。
乳酸桿菌(LB)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格:48人份/盒 精密度:批內(nèi)、批間精密度檢測(cè) Ct 值的變異系數(shù)(CV)均小于等于 3%。
幽門螺旋桿菌(HP)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格:48人份/盒 精密度:批內(nèi)、批間精密度檢測(cè) Ct 值的變異系數(shù)(CV)均小于等于 3%。
遠(yuǎn)緣鏈球菌(S.sob)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格:48人份/盒 精密度:批內(nèi)、批間精密度檢測(cè) Ct 值的變異系數(shù)(CV)均小于等于 3%。
口腔變形鏈球菌(SM)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格:48人份/盒 精密度:批內(nèi)、批間精密度檢測(cè) Ct 值的變異系數(shù)(CV)均小于等于 3%。
超級(jí)**NDM-1基因核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格:48人份/盒 精密度:批內(nèi)、批間精密度檢測(cè) Ct 值的變異系數(shù)(CV)均小于等于 3%。
阪崎腸桿菌核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格:48人份/盒 精密度:批內(nèi)、批間精密度檢測(cè) Ct 值的變異系數(shù)(CV)均小于等于 3%。

滬公網(wǎng)安備 31011702004356號(hào)

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