質(zhì)粒DNA提取遇到的難題

從來沒有遇到過質(zhì)粒提不出來的情況，不過既然出現(xiàn)這種情況，就要想辦法解決??！常規(guī)來說有兩個方面需要注意。一是搖菌的問題。二是提取的問題。不過從你的描述，我覺得你主要在搖菌上有問題，提取過程你都非常注意了，不過純度不是很好，還需要改進，注意蛋白的污染。關(guān)于搖菌，需要注意以下幾點。**，就是原始菌，是不是含質(zhì)粒菌，有沒有被污染，有沒有死亡，如果你的原始菌沒有質(zhì)粒或者很少很少，那么你怎么提也是提不出來的。**，就是***是否加的正確，濃度是多大，有沒有失效等，需要一定的濃度，如果濃度不夠，質(zhì)粒菌就會越來越少，知道*后被雜菌給取代了，當(dāng)然也是提不出質(zhì)粒來。第三，搖菌的時間，要合適，不能長也不能短，一般過夜，大約12-16小時為*好，可以適當(dāng)延長到18小時，時間太長，超過對數(shù)生長期，**的死亡就會增多，導(dǎo)致質(zhì)粒提取的效率下降。第四，搖菌的溫度是不是合適，用溫度計測測搖床的溫度，有時這點容易被忽視。好像就這些了，考慮一下是不是有這些問題。